ICSI单精子显微镜注射操作
ICSI是在37℃的操作平台下,借助显微镜操作仪完成的单精子卵母细胞胞质内显微注射技术。
一、显微操作系统:显微操作系统由操作系统、注射系统和倒置显微镜三部分
组成
1、操作系统:
(1)电动型操纵系统:应用历史较久、系统稳定、准确。
(2)机械型操纵系统:完全使用机械驱动,不需要额外的电线和插座等,操纵台简洁。
2、显微注射器:显微注射器与注射针和持卵针相连,进行注射或抽吸。
3、倒置显微镜
4、显微操作针:主要有持卵针和注射针两种。
二、注射皿准备:在1006皿的中央滴一薄滴制动剂PVP(聚乙烯吡咯烷酮),其周围滴数滴含HEPES的配子体外操作培养液.
三、进行ICSI的时间:取卵后多长时间进行ICSI,目前尚无统一
标准。有研究认为应用HCG后37~41H行ICSI可提高优质胚胎率,也有研究认为取卵后4-8H行ICSI,可提高临床妊娠率和着床率。
四、安装持卵针和注射针:注意调整注射器和操纵杆的位置。
五、精子制动
1、加精:加精前核对患者姓名。
(1)极重度少弱畸精症及手术来源的标本:选取注射皿中间位置的操作液微滴,吸除半量培养液,加入精液标本,有活力的精子会游动到液滴的边缘。
(2)其他精液质量的标本:取微量上游精液标本加入PVP微滴内。
2、精子选择:虽然除多倍体的大头精子外,大部分精子的基因型和表型之间没有特定关系,但少弱畸精子症患者往往需要ICSI助孕治疗,这些男性体内存在更高程度的活性氧,精子DNA碎片和染色体异常发生率更高,因此精子选择对于他们来说至关重要。
3、精子制动:精子在制动剂PVP内游动速度会降低,便于捕捉和制动。
七、IMSI 形态选择卵母细胞之内单精子注射是ICSI的衍生技术。利用精子放大成像系统,可以将观察到的精子放大到6000倍,利于选择形态正常、头部没有空泡、颈部完整的精子进行ICSI操作。
IMSI技术尤其适用于严重少弱畸精症的患者,可以提高其受精率及临床妊娠率。
但IMSI需要配置相应的显微镜头及软件,使得成本增加,显微注射的操作时间也更长。对于精液质量较好的病例,IMSI并不能增加其受精率和临床妊娠率。
因此,考虑到需要投入更昂贵的设备与更多人力,没有必要对所有ICSI患者常规使用IMSI技术。
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